用PICO—TAG氨基酸自动分析仪,测定了5种培养基培育出猴头菌子实体的氨基酸组份及含量,发现培养猴头菌的基质与氨基酸含量密切相关,几种培养基配方中,以D基质配方最优, 100g干品含量中17种氨基酸总量为32·33g,谷氨酸含量高达2·92g,赖氨酸含量为1·30g。
1 与方法
1·1 菌种 所用猴头菌(Hericium crinaceus)从中国科学院微生物研究所引进,经中国热带科学院驯化培育,已成为耐高温菌。
1·2 培养基配方
1·2·1 母种培养基配方:马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂20g,蛋白胨0·05g,自来水1000mL, pH值自然。将配制好的培养基分装试管,高压灭菌后接种,置常温下培养。
1·2·2 原种培养基配方:甘蔗渣70%,玉米粉28%,石膏1%,白糖1%,在25~28℃下,培育20~25d。1·2·3 栽培种培养基:设计五种培养基, A、甘蔗渣70%,玉米粉28%,石膏1%,糖1%; B、甘蔗渣70%,麦皮28%,石膏1%,糖1%; C、甘蔗渣70%,凤尾菇下脚料14%,玉米粉14%,石膏1%,糖1%; D、木屑70%,麦皮28%,石膏1%,糖1%; E、木屑70%,玉米粉28%,石膏1%,糖1%。上述各配方培养基均按常规拌料,含水量一般介于65% ~ 70%之间。配好的培养基分别装入500mL罐头瓶,经灭菌后接种,置常温下培养。
1·3 栽培 栽培种在常温下培育20~24d,待长出子实体后,立即去掉棉花垫子、牛皮纸,移入培养室培养。培养室内温度为24 ~ 33℃,平均27·3℃,相对温度控制在85%~90%之间,要求空气流动、新鲜。培养过程中,菌丝生长时置黑暗条件下,子实体生长时放在漫散射光的条件下。在猴头菌子实体发育成熟而未放孢子前采摘,并烘干待测氨基酸含量。
1·4 氨基酸测定方法 将烘干的子实体,用含1%苯酚的6N盐酸蒸汽处理后,在无氧条件下封管,放入10±1℃的PICO—TAG氨基酸自动分析仪中测定。由于盐酸水解时色氨酸被破坏,故色氨酸未测出来。
2 实验结果
2·1 不同培养基质对猴头菌子实体氨基酸含量的影响
测定结果表明,不同培养基质上生长的子实体,其氨基酸总含量或必需氨基酸占氨基酸总量的百分比均有明显不同(见表1)。