GS试剂制备组织切片的染色效果分析
在常规的病理技术工作中，常需要对病理组织样本进行制片染色来对其进行分析和研究，下面是小编搜集整理的一篇探究GS试剂制备组织切片的染色效果的论文范文，供大家阅读借鉴。
常规病理技术常用的固定剂为4%甲醛，脱水、透明的主要试剂为乙醇和二甲苯。已有研究中证实，常规病理技术应用中相关的试剂多具有较强的刺激性和挥发性，不但病理技术应用存在一定局限，且还会对相关人员的身体健康造成不良影响。因此，寻找一种对人体无毒、无害且安全的替代品已成为病理技术工作者的一种迫切愿望。本研究分别通过GS试剂和传统试剂制备组织切片，并将其分别应用在病理自动化染色的过程中，比较不同方法、不同试剂制备的组织切片的染色效果，现报道如下。
1、资料与方法
1.1一般资料选取湘乡市人民医院自2013年5月~2015年2月期间临床送检的不同活体组织病理标本共计4014例，包括乳腺、结直肠、食管、胃、甲状腺肿物、淋巴结、皮肤、胆囊、脂肪、子宫宫颈、肝脏、扁桃体及肾穿刺组织等不同部分的新鲜病理组织，每份标本都取材2个组织块(组织块的大小为1.5cm×1.0cm×0.2cm)，并分别采用GS环保套液石蜡制片法和传统的石蜡制片法对组织进行处理制片(固定、脱水、透明、浸蜡)，然后将其进行病理自动化染色，将采用GS环保套液处理的标本作为观察组，将传统试剂处理的标本作为对照组，比较两组组织标本的制片、染色效果。
1.2方法采用同一型号全自动脱水机、石蜡切片机、生物组织自动包埋机以及全自动染色机等。GS环保套液由哈尔滨格林公司研究开发生产的。
1.2.1对照组本组组织样本所采用的是经传统石蜡制片法制片并采用传统HE染色法染色方法。制片方法为：采用4%的中性甲醛(或者95%的乙醇和甲醛溶液以9∶1的比例配成固定液)对组织进行固定，经乙醇脱水(经浓度为70%、80%、95%的乙醇和无水乙醇进行梯度脱水)，二甲苯透明，浸腊后使用石蜡包埋。将其切成4~5μm厚的切片。染色方法为：切片70℃烤片10min;分别使用二甲苯Ⅰ和二甲苯Ⅱ脱蜡各5min,然后使用无水乙醇、95%乙醇、80%乙醇梯度脱水各2min,自来水冲洗3min;苏木精染色8min,自来水冲洗3min;1%盐酸分化液分化7s,自来水冲洗;蓝化液1min,自来水冲洗1min;1%伊红染色3min,自来水冲洗7s;70%乙醇、95%乙醇各10s;无水乙醇Ⅰ、无水乙醇Ⅱ各3min;二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ各3min;中性树胶封固。
1.2.2观察组本组组织样本所采用的是经过GS环保染色试剂制片并采用全自动HE染色方法。制片方法为：采用GS无醛固定液对组织进行固定，分别采用脱水液、透明液、浸蜡液分别进行脱水、透明和包埋，采用石蜡切片机进行切片处理。对于标本体积较小的肾穿刺标本而言，需要采用手工单独处理的方法进行制片[1],制片的步骤同上。染色方法为：切片70℃烤片10min;分别使用GS脱蜡液Ⅰ和GS脱蜡液Ⅱ脱蜡5min;然后使用无水乙醇、95%乙醇脱水各30s,自来水冲洗2min;苏木精染色4min,自来水冲洗1min;1%盐酸酒精分化5s,自来水冲洗3min;蓝化液染色1min,自来水冲洗1min;1%伊红染色2min,自来水冲洗10s;除浮染液10s;无水乙醇1min;除水透明1min;透明1min;无苯封片胶封固。
1.3统计学处理用SPSS.17.0统计软件进行数据处理，计量资料采用“x±s”表示，组间比较采用t检验;计数资料用例数(n)表示，计数资料组间率(%)的`比较采用χ2检验;以P<0.05为差异有统计学意义。
2、结果
4014例患者的病理组织经GS环保套液制片与经传统石蜡制片法制片后，比较其组织切片可见，观察组经GS环保套液制片的组织切片效果更加良好，均未出现脱水不完全，组织变脆和变硬的情况;2种方法制片后经HE染色，经GS环保套液染色的时间更短(P<0.05)，且经HE染色后，染色更加均匀，组织细胞的结果清晰，细胞间的裂隙较少。见表1.
3、讨论
在常规的病理技术工作中，常需要对病理组织样本进行制片染色来对其进行分析和研究，但是在脱水、固定等过程中常用的试剂，如甲醛、二甲苯等都具有十分强烈的挥发性和刺激性[2-5],不仅对实验室工作人员的身体健康会产生较大的危害，还会对环境造成很大的污染[6].因而，寻找性能稳定的能够代替甲醛、二甲苯等有害试剂的无毒、环保试剂对于病理技术工作人员和环境保护都具有十分重要的意义，GS环保试剂应运而生。
本研究采用了哈尔滨格林公司[7]开发研制的GS环保试剂和传统的甲醛、二甲苯试剂对不同部位的病理组织标本进行制片和染色，结果可见GS试剂不仅在制片过程中具有更强的渗透性，且能够有效缩短染色过程中的脱水时间，保证组织的细胞能保持原有的结构，不会发生过度脱水而致收缩的现象;由于GS环保套液中的苏木精染液着色迅速，分化后冲洗时间短，也提高了染液的稳定性。在切片的时候，不论对切片的厚度要求怎样，都能发现切片中的组织染色均匀完整，且在显微镜下细胞核和细胞质的颜色分明，色泽十分亮丽鲜艳，有利于更加清晰直观的观察病理组织的细胞结构[8].
综上所述，在病理技术工作中，采用GS环保试剂代替传统的甲醛和二甲苯具有无毒、无污染、无异味释放的优点，染色效果更加满意，且安全性好，制片和染色时间短，值得在病理技术工作中进行推广。
参考文献：
[1]郭效忠，苗志风，刘春荣，等.GS环保试剂在病理制片中的应用体会[J].诊断病理学杂志，2012,7(3)：32.
[2]寇雪梅，赵玉莹.GS环保套液在病理技术工作中的应用[J].黑龙江医学，2012,36(9)：676-677.
[3]田玉旺，朱红艳，苗金红，等.GS环保试剂在病理制片技术中的应用[J].诊断病理学杂志，2011,18(4)：312-313.
[4]宋一民，高冬玲，郝志伟.GS环保染色套液在病理常规染色中的应用[J].诊断病理学杂志，2014,21(4)：256.
[5]易红梅，李艳春，钟仁华，等.GS环保型试剂在病理技术工作中的应用体会[J].临床与实验病理学杂志，2014,30(4)：463-464.
[6]苗金红，田玉旺，朱红艳.GS环保试剂在特殊染色中的应用[J].诊断病理学杂志，2013,20(11)：736-737.
[7]朱卫国，刘春玲，寇雪梅，等.格林组织标本制备及切片染色套液在病理实验室中的应用[J].武警医学，2012,23(7)：610-611.
[8]孙廷谊，谢红建，孔令非.GS试剂在病理自动化染色中的应用[J].诊断病理学杂志，2013,20(4)：254-255.
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