CIK治疗乙型肝炎研究进展
【摘要】 近年来， 细胞治疗已成为临床治疗乙型病毒性肝炎（乙型肝炎）的一种重要手段， 细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）作为一种新型、高效、广谱的免疫活性细胞， 在乙型肝炎治疗中得到广泛应用。本文就CIK的生物学特性、制备和临床应用做一综述。
【关键词】 杀伤细胞;细胞因子诱导;乙型病毒性肝炎
我国属乙型肝炎高地方性流行区， 每年死于肝硬化和肝癌等乙型肝炎相关疾病者达30余万例。乙型肝炎已成为严重危害我国人民健康的重要因素。目前对乙型肝炎的治疗缺少有效手段。最有效的是应用干扰素、拉米夫定等药物抗病毒治疗， 但其治疗反应率不高， 效果并不理想。细胞免疫治疗由于其安全、不良反应少、抗病毒活性高、增强机体免疫等特点成为治疗乙型肝炎的又一手段[1]。
细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine induced killers， CIK）是外周血单个核细胞经多种细胞因子刺激产生的一群异质细胞， 兼有T 细胞强大的抗病毒活性与自然杀伤细胞（NK细胞）的非主要组织相容性复合物（MHC）限制性免疫杀瘤和抗病毒特点[2]。CIK还能分泌多种细胞因子， 提高机体的.免疫能力， 增强抗病毒能力， 在细胞治疗中前景越来越广阔。本文就近年来在CIK治疗乙型肝炎方面的相关研究作简要综述。
1、CIK细胞的生物学特性
CIK细胞是人外周血单个核细胞在体外经多种细胞因子如干扰素（IFN）、CD3单抗和白细胞介素—2（IL—2）等刺激后生成的一群异质细胞。Kim等[3]研究显示， 外周血CIK细胞含量很少， 细胞因子IL—2可促进其增殖。流式细胞仪检测CIK高表达CD3CD8和CD3CD56， 提示其具有T细胞的功能又具有NK细胞的功能。杀伤活性试验显示[4]， CIK能对多种肿瘤细胞如人红白血病细胞株K562、肝癌细胞株HepG2和人肺癌细胞株A549等起到杀伤作用。目前已有大量临床研究报道CIK应用于肿瘤治疗[5， 6]。
2、CIK细胞的制备和扩增培养
CIK细胞来源于外周血单个核细胞， 常规培养方法是应用IFN—γ、CD3单抗和IL—2刺激使其大量增殖， IFN—γ能增加CIK的细胞毒活性， CD3单抗和IL—2能使T细胞活化并增殖。乔林邦等[7]在常规培养中加入重组人粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）可抑制CD3+CD4+T细胞， 增加CD3+CD56+T细胞生成。刘军权等[8]在常规培养中加入CD28 mAb、IL—15和IL—21， 结果显示在CIK细胞培养体系中增加CD28 mAb、IL—15和IL—21， 细胞增殖能力增加， 细胞分泌IFN—Y量显著增高， 经不同刺激因子活化的CIK细胞对A549、MFC—7和HMEl细胞杀伤活性有明显增强。徐本玲等[9]在常规培养中加入重组人纤维连接蛋白（Retro Nectin， RN）结果显示用RN诱导的CIK细胞增殖速度快， 杀伤肿瘤细胞活性高， 细胞因子IFN—γ和肿瘤坏死因子—α（TNF—α）的分泌量增多， 在无血清培养条件下可在短期内诱导出大量的具有生物学活性的CIK细胞。
3、CIK细胞应用于治疗乙型肝炎的临床应用
目前细胞免疫治疗乙型肝炎病毒（HBV）感染已取得一定的疗效。韩际奥等[10]对95例慢性乙型肝炎（CHB）患者随机分组， 自体静脉回输DC/CIK， 患者治疗后3、6个月时病毒载量显著下降， 治疗后1个月后， 患者血清IL—12水平显著高， 提示细胞治疗对HBV有一定的抑制作用。苏海滨等[11]研究显示， 应用CIK细胞治疗慢性乙型肝炎患者， 随访52周后HBV—DNA显著下降。陈作严等[12]将50例慢性乙肝患者随机分成两组。治疗组30例， 接受CIK 细胞治疗一个疗程， 回输细胞数为（1。0～3。2）×1010， 对照组采用常规药物治疗。结果显示30例治疗组患者经CIK治疗后， CD3+、CD4+、CD8+的表达和细胞增殖倍数均明显增加。在近期的疗效观察中， 乙肝患者血清中HBV—DNA含量明显下降， 完全应答率>50%。陈宛丽等[13]应用CIK细胞治疗慢性乙型肝炎， CIK组12例和对照干扰素组21例， 疗程结束6个月后， 患者的谷丙转氨酶（ALT）及HBV—DNA复常率、HBeAg转阴率及HBeAb阳转率均高于干扰素治疗组患者。陈剑等[14]收集72例肝郁脾虚型HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者， 其中42例为CIK细胞治疗组， 30例为口服恩替卡韦（ETV）对照组， 研究表明CIK细胞治疗肝郁脾虚型慢性乙型肝炎患者在24周内是安全有效的， 其抑制HBV—DNA作用较服恩替卡韦差， 但改善肝功能的作用与恩替卡韦相当， 且HBeAg阴转率及血清转换率明显优于对照组。韩际奥等[15]HBsAg致敏的DC—CIK具有较好抗病毒治疗效果， 治疗结束24周后患者病毒学应答总有效率可达63。6%， 其中4例HBV—DNA转阴， 转阴率12。1%。同时治疗后慢性乙型肝炎患者HBsAg浓度及ALT水平亦有所下降。
综上所述， CIK治疗乙型肝炎能够增加患者的免疫功能， 提高抗病毒能力， 是治疗乙型肝炎感染的又一重要手段。
4、存在的问题与展望
虽然目前有关CIK细胞应用于治疗乙型肝炎研究结果令人鼓舞， 但在很多问题上仍然还存在颇多争议， 还有许多问题需要解决。如CIK培养用何种培养基、细胞移植数量、移植途径、移植时机、安全性以及不良反应症等仍需要进一步研究证实。
综上所述， 急需建立CIK的细胞治疗标准化方案来解决这些问题， 相信随着研究的深入， CIK细胞治疗标准化方案的建立、CIK在细胞治疗的应用前景会越来越广阔。
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