神经干细胞与脑梗死康复的研究现状
近年来的研究证实,成年中枢神经系统内广泛分布着神经干细胞(NSC)，海马齿状回颗粒下层和侧脑室下区是成体大脑内源性NSC存在的主要脑区。NSC正常情况下处于静息状态，当大脑受到损伤或出现某些病理性变化时会被激活，分化为成熟的神经细胞，修复受损的神经功能。可以通过某些手段(如康复训练、丰富环境、局部应用外源性神经生长因子)激活自身干细胞或移植干细胞(包括NSC移植和非NSC移植)脑梗死。
神经干细胞;脑梗死;丰富环境;移植
脑梗死是神经科最常见的疾患，尽管其诊断及治疗技术在过去的几十年中有了很大的提高，但治疗效果仍然不尽如人意。以往人们认为神经细胞是不可再生的，但多年来对神经营养因子( neuro tro phic factor , NTF) 及神经干细胞( neural stem cell, NSC) 的研究使人确信：包括人类在内的哺乳动物，在一定条件下神经细胞是可以再生的，新生的神经元可以修复中枢神经系统损伤。因此，NSC 治疗现已成为治疗神经系统疾病最有价值的潜在治疗手段。现将利用NSC治疗脑缺血的策略介绍如下：
NSC治疗脑缺血主要有两个途径：一是通过某些手段激活自身干细胞，放大其治疗作用，达到自身修复的目的；另一途径是移植NSC，这样可以获得大量的干细胞，但来源困难，且存在社会伦限制和免疫排斥反应。
1康复训练
在脑血管病患者发病早期进行及时、有效的康复训练是提高患者生活质量、减少残疾、最大限度回归社会的一个重要措施。李玲等的研究结果显示：大鼠脑梗死24h 后每日给予平衡、旋转、行走等功能训练，其神经功能的恢复较未进行康复训练的大鼠明显［1］，表明康复训练在脑梗死后神经功能的恢复中发挥极其重要的作用。王卫东等的研究显示：缺血性脑损伤后6至24 d 时间窗内，海马齿状回神经前体细胞的增殖水平明显上调，而脑梗死大鼠经康复训练后，齿状回神经前体细胞的增殖水平则进一步升高［2］。由于这些神经前体细胞绝大部分最终发育为成熟的神经元, 并移行到颗粒细胞层与周围的神经元进行整合，参与缺血性脑损伤后记忆功能的恢复［3］因此，缺血性脑损伤后进行康复训练所显示的神经功能恢复水平的提高，与包括海马齿状回在内的大脑多个部位的神经前体细胞增殖水平上调有关。周晓琳等的研究显示：局灶性脑缺血损伤后康复训练组在脑梗死后7 d、1 4 d 和21 d 各时间点海马区NSC 数量均高于相同时间点的未接受康复训练组，表明局灶性脑缺血损伤后，康复训练可以提高内源性NSC 的增殖水平［4］。局灶性脑缺血损伤后，康复训练可以提高内源性NSC 增殖水平，其机制还不清楚，可能通过以下几种途径促进缺血性脑损伤后齿状回神经前体细胞增殖：激发缺血性脑损伤后海马区神经生长因子、脑源性神经营养因子、转化生长因子、碱性成纤维生长因子等的释放；促进、诱导脑内DNA 的合成，激发细胞的有丝分裂；通过促进脑内血液循环，影响缺血性脑损伤后海马区兴奋性氨基酸受体、5羟色胺作用通路中谷氨酸和5羟色胺的代谢。
2 丰富环境( enriched env ir onment) 1947 年，美国人Hebb
提出丰富环境的概念，这一模式被广泛用来研究环境对脑功能的影响。已有研究证实，丰富环境对脑发育和脑损伤修复具有显著的促进作用。1978 年，丰富环境首次被定义为：复杂的无生命物与社会刺激的复合体，即动物的饲养环境空间增大，内置物体丰富而新奇，成员较多，不仅提供了多感官刺激和运动的机会，而且赋予了相互间社交行为的可能。尽管对丰富环境的具体设置各有差异，但总的原则是要增加自发的体力活动、社会性刺激及相互交往的机会［5］。研究表明，饲养于丰富环境的大鼠大脑皮质厚度、质量明显增加，神经元胞体和胞核面积增大，树突野增大，其侧棘增多，突触连接面变大，神经胶质细胞( 特别是少突胶质细胞) 的数量明显增多，且生活在丰富环境中时间越长、环境越丰富、个体之间交往越多，上述改变越明显， 受影响的皮质范围越大。丰富环境可以改善大脑中动脉梗死后成年大鼠的机能。丰富环境虽然对梗死面积没有影响，但可明显改善运动行为和认知能力［6］。Biernaskie 等的研究表明，在卒中后5 d 给予丰富环境是非常有效的，而且无论是卒中后14 d，还是卒中后30 d，接触丰富环境都能进一步促进神经功能的恢复［7］。Yasuhiko 等的研究表明，与假手术组相比，MCAO 诱发了同侧和对侧的齿状回神经前体细胞的先是短暂性增加后是持续性降低的增殖，而神经母细胞的产生一直处于一个低于基线的水平［8］。与标准环境的大鼠相比，处在丰富环境下8 周的MCAO 大鼠和假手术大鼠齿状回的神经元分化和神经发生出现了增加的现象。与假手术组大鼠相比，丰富环境组大鼠MCAO 后也在齿状回恢复了一定数量的神经母细胞。此外，丰富环境组大鼠缺血半暗带的神经蛋白( NeuN) 阳性细胞密度增加，而在这个区域没有发现新神经元。对于丰富环境的研究已经长达50 余年，丰富环境干预已经被证实是一种简便有效的治疗手段，对于延缓衰老、增进智力也有一定作用。不过仍然有很多问题没有解决，比如干预应该从什么时候开始，持续多久，何种干预最为安全有效，对于不同人群干预方式强度应该如何调整，过强的丰富环境刺激对机体有什么不利影响，如何避免这种不利影响。相信随着这些问题的解决，丰富环境干预将会成为被广泛接受的治疗手段。
3NGF
近年来，人们尝试在神经系统损伤局部应用某些激活因子, 以激活存在于损伤局部的NSC，诱导其分裂、增殖、分化为相应神经元或神经胶质细胞，重建、修复损伤的脑组织，扩充在卒中或其他神经疾病发病后用内源性NSC 治疗的可能性。脑室内注射BDNF［9］或脑室区BDNF 基因的过度表达可以使成年大鼠嗅球、纹状体、隔区、丘脑、下丘脑中的新生细胞数目增加。体外培养显示，骨髓间充质干细胞可表达BDNF和NGF，对NSC 凋亡有饱和作用。这些发现使BDNF在脑缺血后促进神经再生的可能性大大增加。但最近有相反的观点，Larsson 等发现，给全脑缺血大鼠的海马内转导携带BDNF基因的重组腺病毒，可促进神经细胞的分化，但未增加新生细胞的数目和延长新生细胞的生存时间。与SVZ 相比，成年的海马齿状回没有固有的NSC，却能使神经元和神经胶质细胞的前体细胞进行有限的自我更新，这与以上试验结果不完全一致。促红素( erythro poietin, EPO) 可能是调节缺血后神经细胞再生的另一个重要因子。EPO 产生是缺血 缺氧反应的一部分，同时， SVZ 可表达EPO 受体。脑室内注射EPO 可降低SVZ 中NSC 的数目，增加从SVZ 向嗅球迁移的新生神经元，增加嗅球的中间神经元；而脑室内注射EPO 抗体可增加SVZ 中NSC 的数目， 减少从SVZ向嗅球迁移的新生神经元。
这项研究结果表明，EPO 是自分泌旁分泌因子，能调节大脑NSC的产生。给梗死后2 d 或几周的成年小鼠脑室内注入EGF, 引起梗死侧纹状体新生细胞数目非常显著的增长, 梗死后13 周，65%的新生细胞表达细小白蛋白，表明EGF促进梗死侧纹状体内中间神经元的转换。Nakatomi 等的研究发现，在缺血性脑损伤后，向脑室内注入生长因子可促进内源性祖细胞的激活， 并观察到其增殖，随后迁移入海马重塑神经元，海马区锥体神经元显著增殖。进一步的研究显示，新生的神经元整合入脑的环路，改善了神经功能缺损的症状。