戈谢病细胞免疫表型及吞噬功能研究
作者;李玉秀 刘永春 王香林 田兰芝 王彩云 李彦会 郝冀洪 李连蛟
关键词: 戈谢病 免疫表型 吞噬
戈谢病(Gaucher's disease)是一种罕见的`脂类代谢异常性疾病,临床资料报道较多,实验室研究资料尚少。我们通过对3例戈谢病骨髓中戈谢细胞的免疫表型及吞噬功能研究,发现戈谢细胞主要表达淋巴细胞抗原,高度表达B淋巴细胞抗原,同时证实戈谢细胞具有吞噬功能。
1 材料与方法
1.1 标本来源 取自3例戈谢病患者骨髓液,迅速制成薄涂片,同时取骨髓液做吞噬功能试验。免疫组化于24 h后进行。
1.2 试剂 ABC试剂盒、单抗购于中国医学科学院血液学研究所。
1.3 方法
1.3.1 ABC免疫酶法 按操作说明书进行。
1.3.2 戈谢细胞墨汁吞噬功能测定 取肝素抗凝骨髓液100 μl,参考陈群芳方法[1],37℃孵箱中,孵育2 h,涂片,用瑞氏染色观察。
1.3.3 戈谢细胞吞噬细菌功能测定 参考临床免疫学方法[2],实验时按墨汁吞噬功能方法操作。
1.3.4 戈谢细胞吞噬胶乳颗粒功能测定 采用市售胶乳颗粒(3.6×108 ml-1),实验时按墨汁吞噬功能方法操作。分级标准:“0”:细胞内未吞噬胶乳颗粒。“+”:细胞内含有1~10个胶乳颗粒。“++”:细胞内含有15~30个胶乳颗粒。“+++”:细胞内含有30~50个胶乳颗粒。“++++”:细胞内含有大于50个胶乳颗粒。
2 结果
2.1 3例戈谢细胞免疫组化结果 结果判断标准分别为强阳性:戈谢细胞呈弥漫的棕黄色,胞浆边缘及条索状结构着色浓厚。细胞核为蓝色,上面覆盖一层棕黄色。胞核模糊不清。阳性:戈谢细胞着黄色,胞浆边缘及条索状结构着色较深,胞核为蓝色,清晰。弱阳性:戈谢细胞浆为淡黄色,细胞边缘及条索状结构着色稍深。胞核为蓝色,清晰。阴性:戈谢细胞浆不着色,核为蓝色。3例戈谢细胞免疫表型结果为:CD8、CD9、CD10、CD18、HLA-DR均为强阳性表达;CD3、CD33、CD15均为阳性表达;CD22均为弱阳性表达;CD7、CD14、CD41均为阴性;CD2、CD4、CD19、CD383例中均为1例阳性表达,而且CD38为强阳性表达。
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