大黄素对大鼠牙周组织抗氧化作用
【摘要】 目的 探讨大黄素对实验性牙周炎大鼠牙周组织的抗氧化作用。方法 将牙周炎大鼠随机分为正常组、模型组、碘甘油治疗组和大黄素治疗组，均用大黄素局部涂抹(3次/d),共30d。治疗结束后测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH?Px)活力。结果 大黄素能显著提高SOD活力，降低血清中MDA含量，并增加GSH?Px活力。结论 大黄素作为一种有效的抗氧化成分，对恢复牙周组织健康有明显效果。
【关键词】 大黄素
研究表明〔1〕，氧源性自由基(Oxygen derived freeradival,ODFR)参与牙周病的病理过程，是牙周损伤的重要分子机制。大黄有效成分蒽醌衍生物主要有大黄素、大黄酸、芦荟大黄素和大黄素甲醚等。其中，大黄素抗菌谱广，抗菌活性强，对肺炎双球菌、链球菌、白喉杆菌、枯草杆菌、炭疽杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌、霍乱弧菌及多种常见的致病性真菌均有较强的抗菌作用，并具有抗炎活性〔2〕。本分文析了大黄素对大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽氧化酶(GSH?Px)活力以及丙二醛(MDA)含量的影响，以期进一步阐明大黄素和治疗牙周炎的作用机制。
1 与方法
1?1 样品来源及纯度 大黄素(中国品生物制品检定所)，纯度为98%，按参考文献〔3〕配制成0?1mg/ml大黄素溶液。
1?2 实验动物及模型制备〔4〕 80只SD大鼠(黑龙江省药品所动物室)，体重200～230g，雌雄各半。随机取出14只作为正常对照组，其余大鼠以2%戊巴比妥钠40mg/kg腹腔内注射麻醉。直径0?2mm结扎钢丝结扎双侧第一磨牙一圈，每周复查2次。结扎7d后，于股四头肌内注射以0?45ml生理盐水稀释的1?25mg泼尼松龙，隔日1次，共8次。选取造模成功的42只SD大鼠随机分3组，模型组、碘甘油治疗组和大黄素治疗组，每组14只。在鼠上颌第1，第2磨牙之间颊腭侧病变处分别注射0?1mg/ml大黄素溶液各0?2ml,30d后均采用摘除眼球法取血，自然凝固3～5h,3000r/min离心20min,吸取血清冷冻保存，待测SOD、MDA和GSH-Px含量。
1?3 检测方法 (1)血清SOD活力测定：采用亚硝酸盐法；(2)血清过氧化脂质的测定：采用硫代巴比妥酸(TBA)法；(3)血清GSH-Px活力测定：采用硫代二硝基苯甲酸(DTNB)直接法。
1?4 分析 采用SPSS 12?0软件进行统计分析，计量资料的组间差异用T检验。
2 结果
2?1 大黄素对血清中SOD活性的影响 各组SOD测定结果为，模型组(420±45?7)，碘甘油治疗组(488±52?6)，大黄素治疗组(476±48?6)，正常对照组(501±33?8)U/L。正常组、碘甘油治疗组和大黄素治疗组血清SOD活力与模型组比较，差异均有统计学意义(P<0?05)，表明大黄素能显著提高牙周炎大鼠血清SOD活力。血清SOD活力与碘甘油治疗组和正常组比较，差异无统计学意义(P>0?05)。
2?2 大黄素对血清MDA含量的影响 各组MDA测定结果为，模型组(7?1±1?1)，碘甘油治疗组(4?83±0?65)，大黄治疗组(5?12±0?67)，正常对照组(4?56±0?56)μmmol/L。正常组、碘甘油治疗组和大黄素治疗组血清MDA含量均与模型组比较，差异有统计学意义(P<0?05)，大黄素能显著降低牙周炎大鼠血清MDA含量，且血清MDA含量与碘甘油治疗组和正常组比较，差异无统计学意义(P>0?05)。
2?3 大黄素对血清中GSH-Px活力的影响 各组GSH?Px测定结果为，模型组(48?7±5?4)，碘甘油治疗组(78?5±8?55)，大黄治疗组(73?2±8?3)，正常对照组(80?3±9.7)U/L。正常组、碘甘油治疗组和大黄素治疗组血清GXH-Px活力与模型组比较，差异均有统计学意义(P<0?05)，表明大黄素能显著提高牙周炎大鼠血清GXH-Px活力，血清GXH-Px活力与碘甘油治疗组和正常组比较，差异无统计学意义(P>0?05)。
3 讨论
在牙周炎活动期，局部毛细血管通透性升高，导致牙龈出血、肿痛，同时有大量吞噬细胞进入局部组织，在吞噬细胞的膜结构中存在产生氧自由基的酶系统，该酶可被细菌及骨毒素、抗原抗体复合物等激活，产生吞噬作用，使耗氧量激增。其增加的`耗氧量基本上都用于生成超氧阴离子。通过自由基链反应又生成其他自由基，引起脂质过氧化，形成过多脂质过氧化物，损伤生物膜。脂质过氧化物分解产物MDA的量可反映机体内脂质过氧化的程度，间接反映出细胞损伤的程度。SOD能清除超氧阴离子，保护细胞免受损伤。在牙周炎活动期，局部组织产生大量自由基，由于强氧化作用损伤SOD活力或由于超氧阴离子生成增多，使SOD消耗增加，因而SOD活力下降。GSH-Px的主要功能是清除各种生物大分子的过氧化物，因此，在牙周炎症期GSH-Pxr活力明显下降〔5〕。大黄素作为一种传统，具有抗炎作用，同时还具有清除氧自由基的抗氧化作用。大黄素对大鼠的脑匀浆脂质过氧化引起的极微弱化学发光均有猝灭作用，构效关系提示大黄素临位与中位羟基取代是该类物质抗氧化所必需的〔6〕。本实验除了证实牙周炎症时，SOD、GSH-Px活力会下降，而MDA含量会升高。同时也证明大黄素除了具有抗菌作用外，还可能通过增加血清SOD和GSH-Px活力，减少MDA含量，对牙周组织起到双重保护作用。
【参考文献】
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