富勒烯封端的聚谷氨酸苄酯膜的制备及清除自由基能力的测定

时间:2020-08-11 09:44:55 硕士毕业论文 我要投稿

富勒烯封端的聚谷氨酸苄酯膜的制备及清除自由基能力的测定

引言
  
  富勒及其衍生物在化学、生物医学、材料学及生命科学等领域有许多的重要的应用前景,因而受到许多研究者的青睐。但是由于富勒的笼状结构使其具有其强的亲脂性,这就导致了其在水中的溶解度很小,使它在生物体系中的研究应用受到很多限制。当前,众多研究者都致力于富勒聚合物的合成,这样既可以将富勒的良好化学性质体现出来,而富勒的引入又使得聚合物具有更好的特性,包括机械性和热学性等。迄今为止,富勒聚合物已经成功应用于电致发光装置(electroluminescent devices)、生物活性材料(bioactivematerials)、光学限幅器(optical limiter)、气体分离膜(gas separation membranes)等[1-6]。
  目前,有研究者将聚谷氨酸苄酯制备成膜[7],以研究其生物学效应,但是对于富勒多肽类的成膜制备以及生物学效应研究还没有报道。本章通过铸膜法将富勒封端的聚谷氨酸苄酯制备成膜,并通过邻苯三酚自氧化实验研究其生物学效应。邻苯三酚自氧化实验主要研究以富勒的特征为主的清除自由基能力。
  
  1 实验部分
  
  1.1 仪器与试剂
  TU-1901 双光束紫外可见分光光度计:北京普析通用仪器有限责任公司;恒温水浴箱:
  北京市医疗设备厂富勒封端的聚谷氨酸苄酯(FPBLG)、聚谷氨酸苄酯(PBLG)均自制FPBLG: 1H NMR(400 MHz,CDCl3),δ:2.2(m,2H), 2.6(d,2H), 3.706(t,2H), 3.739(t,2H),4.24(t,2H), 7.26(m,5H); FTIR(KBr), υmax/cm-1: 696.93, 1520.13, 1625.38, 3033.64, 3290.51;UV-Vis,λ: 229 nm、258 nm、283 nm、418 nm、468 nm、486 nm、494 nm、547 nm、577 nm;MALDI-TOF MS(基质:CCA):数均分子量Mn=1788,重均分子量Mw=1802,分子量分布PDI=1.007.
  PBLG: 1H NMR(400 MHz,CDCl3), δ:2.2(m,2H),2.6(d,2H),3.9(t,H),7.26(m,5H); FTIR(KBr),υmax/cm-1: 696.81, 1541.17, 1663.76(C=O), 2955.86, 3296.86; UV-Vis,λ: 229 nm、258 nm、468nm、556 nm;MALDI-TOF MS(基质:CCA):数均分子量Mn=5847,重均分子量Mw=6266,分子量分布PDI=1.07.
  焦性没食子酸(邻苯三酚)、抗坏血酸(维生素C)、HAc、Tris、EDTA-2Na 均为分析纯
  
  1.2 膜制备
  本文采用铸膜法[7]制备膜,分别取0.165g FPBLG 和PBLG 溶于10mL 二氯甲烷中制成16.5%溶液,室温下溶剂挥发成膜,脱模后60℃真空干燥至恒重。
  
  1.3 水溶胀率的测定
  将试样在(50±2)℃干燥6 h 恒重称量后,在(25±2)℃ 的恒温去离子水中浸泡不同时间。用滤纸迅速擦干试样表面的水后称量。取 3~5个样品的平均值。吸水率 W=(m2-m1)/m1×100%,式中,m1 和 m2 分别为膜的干、湿质量。
  
  1.4 膜密度的测定
  由ρt = aρx/(mt-m0)计算聚谷氨酸苄酯膜的密度,式中,m0 为容器及去离子水的质量和,mt 为薄膜浸入水中后容器及去离子水的质量之和,a 为试样质量,ρx 为水的密度(0.9970g/cm3),ρt 为聚谷氨酸苄酯膜的密度,其中FPBLG 为2.991 g/cm3,PBLG 的膜密度为1.994g/cm3。
  
  1.5 邻苯三酚自氧化体系检测超氧阴离子自由基[8]
  按照, 取两支试管按下表加入25℃预热过的缓冲液,然后加入预热过的邻苯三酚(空白管用10mmol/L HAc 代替邻苯三酚),迅速摇匀,立即倾入1cm 比色杯中,在320nm波长处测定光吸收值,每隔15s 读数一次,测定4min 内每分钟光吸收值的变化。可增减邻苯三酚的加入量,以控制光吸收值。
  
  1.6 数据处理
  本文使用 Excel 统计软件按学生氏t-检验方法进行统计学分析。数据表示平均值±标准偏差,直方图中数据柱代表平均值,上下误差线代表标准偏差。