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NGX6对Wnt/Beta-catenin信号传导通路下游靶分子的影响及其与Wnt
毕业论文
全部作者: | 刘芬 沈守荣 王晓艳 李宏韬 彭娅 廖曼甜 郭勤 刘劼 |
第1作者单位: | 中南大学湘雅3医院消化内科 |
论文摘要: | 目的:(1)探讨NGX6基因对结肠癌Wnt/Beta-catenin信号传导通路下游靶分子的影响,明确NGX6对Wnt/Beta-catenin信号传导通路是否存在抑制作用。(2)阻断Wnt通路对NGX6转录水平表达的影响,明确NGX6与Wnt通路之间是否存在反馈调节。方法:(1)将pCMV-myc-NGX6真核表达载体及pCMV-myc空白载体瞬时转染结肠癌细胞系SW620,采用Western-blot的方法检测转染NGX6前后Wnt/Beta-catenin信号传导通路下游靶分子c-jun, c-myc, cyclinD1的表达。(2)构建LEF1缺失突变体(缺乏N-末端β-catenin binding domain)pcDNA3.1(+)-LEF1DN瞬时转染SW620细胞,阻断Wnt通路,并通过Western-blot及TCF-4荧光素酶报告质粒检测的方法确定阻断的效果.(3)通过RT-PCR检测Wnt通路阻断后NGX6的表达改变情况,判断Wnt通路与NGX6之间是否存在反馈调节作用。结果:(1) NGX6基因瞬时转染结肠癌细胞系SW620后,可以明显下调Wnt/Beta-catenin信号传导通路下游靶分子c-jun, c-myc, cyclinD1的表达.(2)成功构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-LEF1DN, Western-blot及TCF-4荧光素酶报告质粒均证实pcDNA3.1(+)-LEF1DN对Wnt通路具有阻断作用(3)瞬时转染pcDNA3.1(+)-LEF1DN抑制Wnt通路后,NGX6在转录水平的表达有上升。结论:(1)NGX6对Wnt/Beta-catenin信号传导通路下游靶分子具有负性调节作用。(2)阻断Wnt通路对NGX6的表达有影响,Wnt通路与NGX6之间可能存在反馈调节作用。 |
关键词: | NGX6基因; 结肠癌; 信号传导; Wnt/beta-catenin 远程下载 论文(免费PDF论文全文) |
发表日期: | 2007年12月19日 |
同行评议: | (暂时没有) |
综合评价: | (暂时没有) |
修改稿: |
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