siRNA表达载体与阳离子脂质体复合物转染HepG2.2.15细胞实验研究
毕业论文
全部作者: | 杨慧 刘明社 张国英 张芸 赵中夫 |
第1作者单位: | 山西长治医学院肝病研究所 |
论文摘要: | 目的 观察针对HBV X的siRNA表达载体pGenesil-HBV X与阳离子脂质体的复合物对HepG2.2.15细胞转染效果及其对HBVM表达的`影响。 方法 以pGenesil-siAFP表达载体和非转染细胞分别作非特异性序列对照组和空白对照组,用不同配比浓度pGenesil-HBV X与阳离子脂质体的复合物转染HepG2.2.15细胞,荧光显微镜下观察并计算转染阳性细胞百分率,筛选出最佳转染效率的剂量配比。于转染后24、48、72小时采用时间分辨荧光免疫测定技术(TRFIA)检测上清液中HBsAg和HbeAg。结果 pGenesil-HBV X与阳离子脂质体复合物8μl:2.5μg剂量配比组的平均转染率达到了55.1±4.3%,且不影响细胞活性;转染后48小时和72小时后该siRNA表达载体对HepG2.2.15细胞表达HBsAg和HbeAg抑制作用显著(P<0.05);结论 8μl:2.5μg剂量配比组的pGenesil-HBV X与阳离子脂质体复合物是最佳的转染剂量配比,能有效抑制HepG2.2.15细胞表达HBsAg和HbeAg。 |
关键词: | siRNA,转染,阳离子脂质体,HepG2.2.15细胞 远程下载 论文(免费PDF论文全文) |
发表日期: | 2005年09月13日 |
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